ISRIB (trans-isomer) is a potent inhibitor of PERK (IC50=5 nM) that restores protein translation and prevents SG formation in the presence of P-eIF2α.

PERK:5 nM

方法: HEK293T 细胞用衣霉素 (2 µg/mL) 处理细胞以诱导 ER 应激，并用 ISRIB (trans-isomer) 或 ISRIB (cis-isomer) (0-1 µM) 处理 7 h，检测 ATF4 萤光素酶报告基因。
结果: ISRIB (trans-isomer) 的效力 (IC50=5 nM) 比 ISRIB (cis-isomer) (IC50=600 nM) 高 100 倍，表明该化合物与其细胞靶标的相互作用具有立体特异性。[1]
方法: HEK293T 细胞用 Tm (1 µg/mL) 和 ISRIB (200 nM) 处理 1 h，检测翻译和 mRNA 变化。
结果: ISRIB 全面阻断了 ER 应力下发生的平移变化。在 ISRIB 和 Tm 共处理下，大量在应激时表达发生显著变化的基因坍塌到图的中心。[2]

方法: 为研究对记忆的影响，将 ISRIB (0.25-2.5 mg/kg) 腹腔注射给 CD-1 小鼠。
结果: ISRIB 治疗的小鼠在空间和恐惧相关学习方面表现出显著的增强。[1]

U2OS cells are plated on 96-well plates and left to recover overnight. Cells are treated with either with 2 μg/ml tunicamycin or 100 nM thapsigargin in the presence or absence of 100 nM ISRIB or with ISRIB alone for the indicated and the level of eIF2α phosphorylation is determined[1].